نوقشت في جامعة تكريت /كلية التربية للعلوم الصرفة اطروحة دكتوراه في قسم الكيمياء بعنوان( دِراسَـــــة حركيـــــــة وتنقيــــة جزئيـــــة لأنزيــــــم الكلوتاثايون S- ترانسفريز وبعض المتغيرات الكيموحيوية من دم المصابيـن بالثلاسـيميا الكبــرى فــي مدينــة كــركـــوك) للطالب علي رحمن نامه. بين الباحث في دراسته ان بيـتا الثلاسيميـا الكبـرى هو مرض فقر دم وراثي ناتج من نقص في سلاسل بيتا كلوبين الذي يكون فـيه مستويات الهيموكلوبين أقل من (7 g/dL) . يعتمد المرضى على عمليات نقل الدم للبقاء على قيد الحياة .شملت عينات البحث من المرضى في هذه الدراسة على (100) عينة لكلا الجنسين ، وكان العدد (50) من الذكور ، و(50) من الإناث وتراوحت أعمارهم ما بين (2-30) سنة . وشملت عينات مجموعة السيطرة (40) عينة ، منها (20) عينة من الذكور ، و(20) عينة من الإناث وتراوحت أعمارهم أيضا ما بين (2-30) سنة . تم جمع عينات الدم من المرضى المصابين بمرض بيتا ثلاسيميا الكبرى المراجعين لمركز الثلاسيميا في مستشفى أزادي التعليمي في محافظة كركوك . ومجموعة السيطرة بعد إبلاغهم بمراجعة المستشفى لسحب الدم منهم . للفترة من شـهر كانـــون الثاني ولغـــاية شهــــر أيــــار لســنة 2022 .
أظهرت نتائج الدراسة فروقات معنوية عند مستوى (P≤0.05)في المتغيــرات الحيوية موضوع البحث . حيث ارتفع مستويات كل مما يأتي ارتفاعاً معنويـــاً : الكلوتاثايون-S-ترانسفريز ، الكلوبيولين المناعي G والكلوبيولين المناعي M ، الحديد ، الفيريتين ، الاسبارتيت ناقلة الأمين ، ألأنين ناقلة الأمين ، الفوسفاتيز القاعدي ، البيليروبين الكلي والمباشر وغير المباشر ، حامض اليوريك ، والمالون ثنائي الالديهايد . بينما انخفضت مستويات كل من مضادات الأكسدة الكلية ، الهيموكلوبين ، فيتامين D الكلي ، فيتامين B12 ، البروتين الكلي ، الألبومين ، الكلوبيولين ، الزنك والكالسيوم انخفاضاً معنويا .
بينت الـــدراسة بان للجنس والعمر تأثيــراً معنوياً واضحاً عند المقارنة بين المرضى ومجموعة السيطرة وخصوصاً مع تقدم العمر . بينما لم تظهر أي فروقات معنوية عند مستوى (P>0.05)عند المقارنة ما بين مجاميع المرضى فقط حسب الجنس والعمر .
تم التنقية الجزئية لأنزيم الكلوتاثايون-S-ترانسفريز باستخدام تقنية كروماتوكرافيا الترشيح الهلامي . تم الترسيب باستخدام كبريتات الأمونيوم ، وأجري الديلـزة للجزء الراسب الذي فيه فعالية الأنزيم عالية . تم الحصول على ثلاثة حزم لفعالية الكلوتاثايون-S-ترانسفريز ، وكانت فعالية الانزيم في الحزمة الثانيـــة أعلى ، ومنــه تم تعيين الــوزن الجزيئــي التقريبي للأنزيم . اسُتخِدمَت منحني المعايرة القياسية لعـــدة بروتينــات قياســـية معلومة الأوزان الجزيئية للحصول على المعادلة الخطية التي منها تم تعيين الوزن الجزيئي التقريبي لأنزيم GST وكانت حوالي (25882 دالتون) .
تم دراسة حركية GST المنقى جزئياً من مصل الدم المريض مع تحديد الظروف المثلى له . وكانت النتائج الظروف المثلــى لعمـــل GST باستخدام المحلول المنظم بتركيز (0.12 mol/L) عند تركيز البروتين المنقى (25 mg/mL) ، والأس الهيدروجيني (pH= 6.5) ، وزمن الحضانة (12 دقيقة) ، ودرجة الحرارة (25°C) ، وتركيز مادة الأساس1-كلورو ثنائي نايترو بنزين CDNB (mmol/L 22.463) .تم إيجاد قيم السرعة القصوى Vmax وثابت ميكاليس- منتن Km باستخدام رسم Lineweaver-Burk حيث كانت قيمة (Vmax = 0.555 µmol/min) وقيمة (Km= 12.5 mmol/L) . وتمت دراسة تأثير أحد المثبطات على فعالية GST باستخدام المركب Benzyl Chloride وكانت نوع التثبيط غير تنافسـي .
