تمت مناقشة رسالة ماجستير في جامعة تكريت بعنوان (عزل وتشخيص الخمائر المصاحبة لالتهاب المسالك البولية في مدينة سامراء والتحري عن الفعالية البايولوجية لمستخلص الفطرsp Agaricus تجاهها ) للطالب محمد عامر سعدالدين .
استهدفت الدراسة الحالية عزل وتشخيص الخمائر الفطرية من عينات مرضى التهاب المسالك البولية من حالات سريرية وتم تشخيصها بالاعتماد على تقنيات الزرع المختبري على أوساط زرعيه وتقييم بعض العزلات من خلال أنتاجها للانزيمات وتكوينها للأنبوب الجرثومي Germ tube وتشخيص الخمائر المعزولة على المستوى الجزيئي الجيني لعزلات منتخبة وتحديد النمط الوراثي لها . وتقدير كفاءة بعض المضادات الفطرية للخمائر في نموها. ولتحقيق هدف الدراسة تم جمع 120 عينة أدرار للفئة العمرية من 3-70 سنة لكلا الجنسين من مرضى التهاب المسالك البولية مشخصة سريريا من قبل الأطباء المختصين في مستشفى سامراء العام وقطاع الرعاية الصحية الاولية وبعض العيادات الطبية في مدينة سامراء / صلاح الدين . وقد جمعت العينات للرجال والنساء والاطفال خلال الفترة مابين (1-11-2020) ولغاية (1-2-2021 ). وتسجيل بيانات خاصة تتعلق بالجنس والعمر والأعراض والأدوية المستخدمة والأمراض المزمنة وما إذا كانت الإصابة أول مرة ام متكررة . ، وبعدها نُقلت عينات الادرار Cup Urine مباشرة إلى المختبر ، وزُرعت على وسط السابرود دكستروز آكــار SDA و HiCrome Candida Differential Agar وCryptococcus Differential Aga والحاوي على المضاد البكتيري Chloramphenicol . توصلت الدراسة الى تشخيص 70 عزلة من الخمائر حيث تضمنت الدراسة الحالية جوانب تشخيص الخمائر على المستوى الجزيئي بالاعتماد على الزوج البادئ العام (Universal primers ) ITS1 و ITS4 لمنطقة ITS region Internal transcribed spacer وجزء من منطقة S 18 ومن خلال تضخيم (5.8S ITS2 ) ITS1 لتسعة عشر عزلة منتخبة من الخمائر المعزولة من مرضى التهاب المسالك البولية في هذه الدراسة , والتي اعطت حجم واحد لنواتج البلمرة PCR والذي كان 650 زوج قاعدي حيث , اظهرت نتائج بلمرة معتبرة اشتملت على نمط وراثي وبطول واحد عبرت تلك النواتج عن نجاح التضخيم لمنطقة طويلة أعطت نتائج التشخيص الجزيئي للخمائر وجود أربع اجناس مختلفة من الخمائر لدى مرضى المسالك البولية غير المثبطين مناعيا كان الاكثر سيادة للجنس Candida spp بواقع أربعة أنواع وهي C.albicansو C. parapsilosis وC.krusei , C.tropicalis وقد كـــــــان النــــوعC. albicans هو المسيطر من بين الأنواع المعزولة ، إذ بلغ عدد عُزلاتها 20 عزلة من مجموع 70 عزلة ، أي بنسبة 28.57% بينما سجل النوعان C. parapsilosis و C.tropicalis15.71% وبواقع 11 عزلة لكل منهما اما النوع C.krusei فكان بواقع 5 عزلات بواقع 7.15%. أما الجنس الثاني من الخمائر فكان لخميرة sppCryptococcus بواقع 9 عزلات , حيث سجل النوع Cry.neoformans 6 عزلات و بنسبة 8.58% أما عدد عزلات النوع الثاني gattiiCry. كان بواقع 3 عزلات وبنسبة 4.29%. أما الجنس الثالث فكانت لخميرة Trichosporon حيث عزل النوع Trichosporon mucoides النوع وكان عدد العزلات 8 عزلة بنسبة11.42 % . وكان الجنس الرابع أقل تردد Pichia kudriavzevii فقد كان بواقع 6 عزلات وبنسبة 8.58% اظهرت العزلات على وسط HiCrome Candida الوان اخرى حيث جائت نتائج التشخيص الجزيئي غير مطابقة لشريط التشخيص الخاصة بمصدر الوسط لذلك لايمكن الاعتماد علية في تشخيص الخمائر بشكل اساسي . أظهرت عزلات خميرة Cryptococcus.neoformans على الوسط التفريقي Cryptococcus Differential Agar بلون أزرق فاتح – جاف كما اععطت مستعمرات Cry. gattii ذات لون بني مخاطي تميز بها هذا النوع , وتم تصبيغها بالحبر الهندي حيث اعطت الكبسول نتيجة موجبة . واعطت عزلات Trichosporon mucoidesعلى وسط السابرود دكستروز آكار SDA مستعمرات ذات لون كريمي مجعدة ومرتفه وذات قوام جاف. بينت الدراسة اختبار حساسية العزلات المعزولة وذلك باستخدام بعض المضادات الفطرية الخاصة بالخمائر Fluoconazol (FLC)،Ketoconazol (KT) ، Itraconazol (IT)، Clutraimazol(CC)،Amphotericin B (AB) وأهم المضادات تأثيرﴽ هو .Fluoconazol كما تم الكشف عن المركبات الفعالة في مستخلص الفطر الكحولي gennadiiA. حيث تبين احتوائه على عدد من المركبات الفعالة وهي كل من الفينولات phenolic والفلوفونويد flavonoid والصابونيات Saponin والتربينات terpinoid والقلويدات alkaloid .أ ظهرت نتائج مستخلص الفطر الكبير Agaricus gennadii على الخمائر قيد الدراسة تأثر الفطر في جميع التراكيز حيث كان التركيز 100% هو الأعلى بين التراكيز بينما كان التركيز 25% هو الأدنى بينها وكان الفطر Trichosporon mucoides هو الأعلى Inhibition zone لمستخلص الفطر Agaricus gennadii مقارنة بالفطر C. parapsilosis, وسجل الفطر Trichosporon mucoides أعلى Inhibition zone بتركيز 100% حيث بلغ 61.13 ملم بينما سجل ذات النوع أدنى Inhibition zone وقد بلغ 15.25 ملم عند تركيز 25% و سجل الفطر C. parapsilosis أعلى تثبيط عند تركيز 100% بلغ 60.33 ملم في حين سجل التركيز 25% للفطر ذاته أدنى Inhibition zone بلغت 37.27 ملم كما تغلب متوسط النوع الفطري C. parapsilosisعلى متوسط النوع mucoidesT. حيث بلغ 43.52 ملم لخميرة C. parapsilosis بينما كان متوسط النوع الثاني mucoidesT. 26.90 ملم , أما متوسطات التركيز فقد تفوق متوسط التركيز 100% على جميع متوسطات التراكيز الاخرى حيث بلغ 20.20 بينما اعطى متوسط التركيز 25% ادنى قيمة مابين المتوسطات الاخرى حيث بلغ 8.75 في حين لم تعطي الأنواع الأخرى C. tropicalis و C. albicans و Cry.gattiiو Cry. Neoformans وPichia kudriavzeviiفي هذه الدراسة حيث أنها لم تظهر أي استجابة تثبيطية تجاه المستخلص.ونظرﴽ لعدم وجود دراسات عن المركبات الفعالة للفطر Agaricus gennadii تعد هذه الدراسة الأولى على مستوى العالم .
