(تقييم ضراوة Ureaplasma spp. و Mycoplasma spp و Candida albicans المعزولة من النساء الحوامل وعلاقتها بالإجهاض في محافظة صلاح الدين)رسالة ماجستير في جامعة تكريت

تمت مناقشة رسالة ماجستير في جامعة تكريت / كلية العلوم للطالبة (هبة ثائر مهدي) الموسومة(تقييم ضراوة Ureaplasma spp. و Mycoplasma spp و Candida albicans المعزولة من النساء الحوامل وعلاقتها بالإجهاض في محافظة صلاح الدين).وقد هدفت هذه الدراسة إلى عزل وتشخيص بكتريا Mycoplasma و Ureaplasma وخميرةCandida albicans المعزولة من النساء الحوامل اللاتي تعرضن لإجهاض سابق و نساء مجهضات في وقت اخذ العينات ومقارنتها مع العزلات العالمية . إذ جمعت العينات بشكل مسحات من عنق الرحم من النساء الحوامل المراجعات إلى العيادات الاستشارية النسائية ومن صالات الولادة في مستشفى صلاح الدين العام ومن العيادات الخاصة في مدينة تكريت وبأعمار تراوحت بين (18-40) سنة خلال المدة من تشرين الأول 2020 إلى شهر آذار 2021. أجري الزرع ألمختبري باستخدام أوساط زرعيه خاصة بالبكتريا والخمائر وأظهرت النتائج إن 24 عزلة عائدة إلى جنس .Mycoplasma spp وبنسبة 20% و11 عزلة عائدة إلى جنس .Ureaplasma spp وبنسبة 9.1% و25 عزلة عائدة إلى خميرة Candida albicans وبنسبة %20.8من المجموع الكلي للعزلات والبالغ عددها 120 عزلة , في حين بلغ عدد العزلات السالبة 60 عزلة وبنسبة 50 % . ومن خلال نتائج التشخيص المظهري والمجهري كانت أعلى نسبة إصابة لدى الفئات العمرية (25-30 ) إذ بلغت 12(50%) . Mycoplasma spp و6 (%54.5) . Ureaplasma spp و10 (40%) Candida albicans فيما سجلت الفئة العمرية (39 –(46 اقل نسبة إصابة 1(%4.1) .Mycoplasm spp و1(9%).Ureaplasma spp و2 (8%) Candida albicans.كما تم الكشف عن بعض عوامل الضراوة إنتاج إنزيم Hemolysin وإنزيم Protease وإنزيم Urease للعزلات المدروسة فقد بينت النتائج إن للأنواع المعزولة قابليات مختلفة في إنتاج إنزيم الهيمولايسين Hemolysin إذ كانت عدد العزلات المنتجة لأنزيم من بكتريا Mycoplasma 14 وبنسبة 58.3)%) إما بكتريا Ureaplasma فكانت جميع العزلات منتجة لإنزيم Hemolysin وبنسبة 11(100%) إما عزلات خميرة Candida albicans فكانت عدد العزلات المنتجة 15 (60%) إما العزلات الغير منتجة للهيمولايسين فكانت 10 (40%) , إما إنتاج إنزيم Urease فقد اظهرت بكتريا Mycoplasma عدم قدرتها على انتاج انزيم Urease كذلك خميرة Candid albicans لم تظهر لها قدرة على إنتاج إنزيم Urease إما عزلات بكتريا Ureaplasma فظهرت جميعها قابليتها على إنتاج إنزيم Urease وبنسبة 100 % , وفيما يخص إنتاج إنزيم Protease فظهرت خميرةCandida albicans قابليتها على إنتاج إنزيم Protease وبنسبة 20(80%) إما عدد العزلات الغير منتجة كانت بنسبة 5(20%) كما أظهرت عزلات خميرة Candida albicans قابليتها على تكوين الأغشية الحيوية وبنسبة 13 (52%) إما عدد العزلات الغير منتجة كانت 11 (48.48).كما أجري التشخيص الجزيئي لبعض العزلات البكتيرية المنتخبة وتحديد تسلسل القواعد النتروجينيه لنواتج الحامض النووي المضاعفة بواسطة البادئ الخاص بج ين 16SrRNA وقد أثبتت نتائج التحليل لتسلسلات الحوامض النووية المضاعفة إن العزلات البكتيرية تعود للأنواع Mycoplasma hominis و Ureaplasma pravum , يوجد فيها تشابه وبنسبة 99% بين العزلات المحلية وتسلسلات القياسية المسجلة في قاعدة المركز الوطني لمعلومات التقنية الحيوية National center for Biotechnology in formation (NCBI) كما لوحظ وجود طفرات نقطية ضمن طفرات الاستبدال أو الإضافة بين القواعد النتروجينية تم مقارنة التسلسلات العائدة للعزلات المحلية وتلك القياسية وهذه الطفرات حدثت تلقائيا.كما أظهرت نتائج الكشف عن قدرة العزلات البكتيرية والخمائر على إنتاج بعض عوامل الضراوة جزئيا والتي شملت يوريز urease في Ureaplasma وإنتاج جينات البروتينات الدهنية adk adenylate kinase وglyA Serin hydroxymethytransferase في Mycoplasma و الجينات المسئولة عن تكوين الأغشية الحيوية والالتصاق في خميرة Candida albicans وهي ALS1, ALS3,HWP1 اذ كشفت النتائج عن قدرة بكتريا Ureaplasma parvum على إنتاج إنزيم Urease بواسطة تقانة البلمرة (PCR) وباستخدام بوادى خاصة بالكشف عن جين Urease , كما أظهرت النتائج امتلاك بكتريا Mycoplasma hominis جينات بروتينات جدار الدهني adk و glyAإذ إن جميع العزلات تمتلك الجينات بااستخدم تقنية PCR وباستعمال جهاز التدوير الحراري thermocycler , اما بالنسبة لخميرة Candida albicans فقد أظهرت جميع عزلات الخميرة المنتخبة امتلاكها جينات ALS1 و ALS3 ولكن لم تظهر إي من العزلات قدرتها على التعبير عن جين WPH1.كما اجري فحص قابلية العزلات البكتيرية والخمائر على مقاومة المضادات الحيوية تم استخدام 9 مضادات حيوية للعزلات البكتيرية إذ امتازت الأنواع البكتيرية بمقاومة مطلقة للمضادات Clindamycin و Ofloxacin و Erathromycin وبنسبة 100% كما أظهرت حساسية عالية للمضاد الحيوي Chloramphenicol وبنسبة حساسية 100% كما أظهرت حساسيتها وبنسب اقل اتجاه مضادات Gentamicin بنسبة 91.6 لبكتريا Mycoplasma وبنسبة 80% لبكتريا Ureaplasma ومضاد Doxycycline وبنسبة 83% لبكتريا Mycoplasma و72.7% لبكتريا Ureaplasma ومضاد Ciprofloxacin وبنسبة 70.8% لبكتريا Mycoplasma و54.5% لبكتريا Ureaplasma كما أظهرت العزلات حساسية اقل اتجاه المضادات Azithromycin وبنسبة 50% لبكتريا Mycoplasma وبنسبة 45 % لبكتريا Ureaplasma ومضاد Tetracycline بنسبة 16.6 لبكتريا Mycoplasma و18.1 لبكتريا Ureaplasma.اما خميرة Candida albicans فأظهرت حساسية متفاوتة للمضادات الحيوية حيث أظهرت حساسية لمضاد ketoconazol وبنسبة 92% وبنسبة 80% لمضاد Fluconazole وبنسبة اقل لمضادات Clotrimazole وبنسب68 % ومضاد Itraconazole وبنسبة 65% ومضاد Amphotericin وبنسبة 48%.ومن اهم الاستنتاجات التي جاءت بها الرسالة هي:
1- إن بكتريا Mycoplasma هو النوع الأكثر انتشارا مقارنة بالنوع Ureaplasma ولوحظ وجود علاقة وثيقة بين الإصابة والإجهاض .
-2 إن خميرة C.albicans القدرة على أنتاج الأغشية الحيوية مما يجعلها مقاومة لعملية البلعمة ومقاومة للمضادات الحيوية.
-3ارتباط انتشار عدوى mycoplasma و Ureaplasma مع الإجهاض التلقائي وتعد سبباً من أسباب الإجهاض.
-4 نسبة العدوى اكبر في الفئات العمرية 20 -35 فيما تكون اقل في الفئات العمرية الاخرى
-5جينات ضراوة ALS1,ALS3 في خميرة C. albicans المسوؤلة عن التشفير بروتينات الجدار الخلوي وتكوين الغشاء الحيوي والمهمة في الالتصاق وغزو خلايا المضيف .
-6امتلاك Ureaplasma على جين ضراوة Urease وبكتريا Mycoplasma تحتوي على جينات تشفير بروتينات الجدار الدهنية adk, glyA.
7- إن خميرة C. albicans لها القدرة على أنتاج عوامل الضراوة مما يزيد من امراضيتها .
8 - يعد التشخيص الجزيئي من أفضل الطرق لتشخيص أنواع من البكتريا
9- وجود طفرات انتقال واستبدال في تتابعات القواعد النتروجينية للجين مقارنة مع العزلات القياسية
10- هناك تطابق بين عزلات Mycoplasma و Ureaplasma المعزولة محليا مع العزلات القياسيو وبنسبة 99%
11- قابلية اغلب العزلات على إنتاج العديد من عوامل الضراوة .

وقد اوصت الباحثة في دراستها عدة توصيات منها:
-1نوصي النساء الذين تعرضن لحالة فقدان جنين قبل التفكير بالحمل مرة ثانية بأجراء مسحة للتأكد من عدم وجود بكتريا Mycoplasma للعمل على علاجها قبل الحمل مرة ثانية
-2نوصي باستخدام تقنية PCRفي الفحص لانه يوفر الكثير من الوقت في اكتشاف المسبب المرضي
-3الاهتمام والتركيز على جانب الصحي للنساء الحوامل من اجل تقليل حدوث الالتهابات المهبلية لما تسببة من مضاعفات على النساء الحوامل
-4يوصي العلاج المبكر للمضادات الحيوية للحصول على نتيجة حمل جيدة وتجنب المضاعفات
-5ألمحافظه على سلامة الجهاز المناعي والعمل على تقوية مناعة الحوامل لان بكتريا Mycoplasma وUreaplasma وخميرة المبيضات البيضاء من الممرضات الانتهازية التي تسبب الأمراض عند ضعف الجهاز المناعي
-6تجنب الاستخدام العشوائي للمضادات الحيوية لانها تسبب ظهور سلالات مقاومة من البكتريا والخمائر
7-الكشف عن انواع اخرى تابعة لبكتريا Mycoplasma و Ureaplasma وعلاقتها بالاجهاض
8-الاهتمام بدراسة التباين الوراثي لبكتريا Mycoplasma و Ureaplasma
9 – الكشف عن جينات الضراوة الأخرى جزيئيا.

 PHOTO-2021-09-19-12-01-03 1 7a885
PHOTO-2021-09-19-12-01-02 06170